蛋白质的沉淀反应

问题描述:

蛋白质的沉淀反应
乙醇引起的变性与沉淀
取3支试管,全部装1ml蛋白质溶液
1号试管:加入1ml 95%乙醇和pH4.7缓冲液
2号试管:加入1ml 0.1mol/l NaOH溶液和1ml 95%乙醇
3号试管:加入1ml 0.1mol/l HCl溶液和1ml 95%乙醇
现象:1号有白色沉淀,其它无明显变化
再向各管加入8ml水,再2、3号试管各加1滴甲基红
现象:2号为黄色溶液,3号是红色
再用0.1mol/l醋酸溶液中和2号试管,用0.5mol/lNa2CO3溶液中和3号试管
现象:2号有沉淀,溶液变红色;3号有沉淀,溶液变黄色
每管加0.1mol/l HCl溶液数滴
现象:1、2、3号试管沉淀溶解,2号仍是红色,3号由红变黄
请问这个实验到底是什么原理说明乙醇变性与沉淀的?为什么要加甲基红,为什么要中和?

首先:你要知道,蛋白质是带有电荷的,一种蛋白质在某一个pH下,蛋白质的电荷被中和,溶解度最小,这个pH成为等电点.(你们用的蛋白质的等电点估计就是4.7)
其次,乙醇使得蛋白质的二级、三级、四级结构变化,但是不改变蛋白质的一级结构,也就是说,蛋白质还是原来的两性物质(既有酸性又有碱性,所以能够溶于酸和碱).
好了
1号管有乙醇,还有缓冲液(缓冲液就是由酸碱组成的),1号管沉淀了,你要说明这是因为乙醇而不是缓冲液啊.
所以你需要二号三号管来证明,酸和碱都没有使蛋白质沉淀(因为变性的蛋白质被酸碱溶解了),而且中和之后就发现沉淀出现了,说明沉淀是因为乙醇而不是酸碱.
至于甲基红,是为了指示酸碱度,你不是要中和嘛,没有指示剂你怎么滴定?