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基因组为何PCR 不出条带,

分类: 作业答案 • 2022-01-07 11:54:14

问题描述：

基因组为何PCR 不出条带,
测出的浓度为4480ng/ul 基因组PCR和片段质粒PCR一样吗有什么区别比如引物量和模板量、温度等等

答

模板浓度足够了.
你的体系是否正确?
降低退火温度试试.

荧光定量PCR引物为什么要跨内含子设计,大家都说是为了避免提RNA时残留基因组的干扰,但是即使跨了内含子,假如有基因组残留,Real time PCR中还是能P出比cDNA大的一条带（含内含子的条带）,探针同样会结合这条大的片段,不会只结合小的片段,还是会干扰定量,除非引物只能扩增cDNA,不能扩增基因组,那就不存在基因组的干扰了.很困惑,请各位指教.
rna提取的OD260/280是2.0左右,但总是跑不出条带,下面要做rt-pcr,怎么改进啊,用天泽的盒子提取的rna,测得OD260/280=2.06,浓度65ng/ul 提了好几次都是2.0左右,但一直跑不出rna条带,倒是有dna带,下面要做rt-pcr,我是新手,第一次提的时候是有rna的,不过条带拖尾厉害
我在做overlap PCR,两个片段一条736bp,一条255bp,20个重叠碱基,四个引物的TM值都是59度,两条都P出来了现在加入两端的引物,就是扩不出来1000的条带,这20重叠有13个是CG对,我不知道是不是退火温度的原因,54°了都,总之就是两条链不连,
基因组DNA酶切后,可用于PCR扩增吗?直接用基因组PCR扩不出来,想先把它切短一些试试,可行吗?用HindIII 酶切基因组后要先纯化吗 ?有别的好建议也好
pcr产物电泳后为何条带过宽,而且有的条带清晰,有的则不清晰
为什么我DNA跑琼脂糖凝胶电泳时跑不出孔我们用PCR扩增出来的DNA分子,在跑琼脂糖凝胶电泳回收时居然跑不出孔但是有条带,不知道是什么原因,另外说明一下,不是琼脂糖凝胶电泳的问题,因为我点了几次,而且其他的都能跑出很好的条带（不是一批上的PCR反应）,而就这一批上的没跑不出电泳,请专业人士分析一下我是不是加错了什么东西让DNA分子不带电.（我加的东西：buffer,dNTP,引物,酶,ddH2O,TE）加的东西也没问题天天用引物也没问题.我扩的pcr一般在几百bp 不可能跑不出去或者太大我用的3000marker作对照,而且另一批跑出去了.就算我没有扩对目的基因,也会有不对的带啊但它在胶空那儿有很亮的带
PCR-DGGE检测厌氧反应器中的微生物,为何测序回来的结果大都是所谓的宏基因组呢?与预期的一点边都不沾啊
[PCR,RT-PCR,质粒构建,求助]PCR的时候用普通Taq酶能P出的东西,为什么换了高保真酶之后,同样的循环条件为什么P不出条带?
PCR时小鼠GAPDH扩出条带而目的基因却扩不出是什么原因?
用takara的试剂盒提取大米和大豆的基因组,pcr之后跑电泳,但是电泳总是没结果,没条带.
如图,在Rt△ABC中,D是斜边BC的中点,E、F分别为AB、AC上的点.求证：△DEF的周长大于BC.
提RNA OD值很高,但反转录的cDNA值还可以,

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