Ecor1 和 Nco1双酶切体系的配制
问题描述:
Ecor1 和 Nco1双酶切体系的配制
如题,多少微升?选用什么buffer?总体积多少?酶各加多少?
Ecor1有2种,1是toyobo公司的,1是fermentas的,Nco1是biolab公司的。你的意思是20ul体系,1ulEcor1 和1ul Nco1.我要同时切pET32a,请问pET32a和DNA 可以同时在一个体系里酶切吗?
答
你用的是哪个公司的酶?不同公司的buffer不一样的.
不过,对于一般的体系,可以选择10微升体系或20微升体系.具体是1/10体积的buffer,酶的总体积控制在1/10以内,比如10微升体系酶量不要超过1微升,20微升体系不要超过2微升.DNA加入1~1.5微克即可.用水补足体积.