35KD的蛋白,SDS-PAGE分离胶一般用多大的?
问题描述：
35KD的蛋白,SDS-PAGE分离胶一般用多大的?
答
10%的刚刚好.10%的SDS-PAGE胶最小可以分离到20kDa；35kZDa的蛋白将正好处于全胶中间偏下的位置,所以刚刚好.如何根据蛋白分子量的大小选择SDS-PAGE的浓度，是不是有个表？我在分子克隆上面只看到标示丙烯酰胺的浓度对应可分离蛋白的范围，求指教那个分离范围表，大体上是这样的：~5-50 kDa: 18 %~5-60 kDa: 16 %~10-80 kDa: 14 %~20-150 kDa: 12 %~30-200 kDa: 10 %~40-250 kDa: 8 %~60-300 kDa: 6 %~100-400 kDa: 4 %我经常杂一个35kDa的蛋白，根据我的经验，10%的胶最好。太硬的胶，转膜花的时间比较长。