要分离77KD和80KD的两个蛋白,要用多大浓度的SDS-PAGE胶能有较好的分辨率?
问题描述：
要分离77KD和80KD的两个蛋白,要用多大浓度的SDS-PAGE胶能有较好的分辨率?
我目前用的10%的胶能看出来大小差别,但是不太明显?如果跑的时间长些,条带就会糊掉.用浓度高些是不是会好些呢?
kate_1018 我想问下如果用到12%的胶，跑的时间足够长，预染marker的位置和10%的达到同样位置的时候，这样两条带的差别还是会小于10%的胶吗？你说的“用好点的材料制备凝胶”，是说用好点的丙烯酰胺和甲叉吗？你说的“将电泳电压在后半程调高可改善条带清晰度”，是有实际经验的吗？还是理论上的？我一般都是 80浓缩
答
一般凝胶浓度低是容易出现条带模糊的情况.个人手法是：用好点的材料制备凝胶来进行分析.10%的浓度可以用来分离这两种蛋白,将电泳电压在后半程调高可改善条带清晰度.也可以调高分离胶浓度至12%,但差别会较10%的更小....