关于构建表达载体
问题描述：
关于构建表达载体
设计的PCR引物 F 5-GGA TCC ATA GTG AAG GCA GGA ATC ACA ATC-3、R 5-GCT CTT AGG CCA CAT GGT ,引物含BamHI/XbaI酶切位点,P了DNA沉淀之后,将其连接到含EcoRI的pCRTM 2.1 上,再用BamHI/XbaI酶切后连接到表达载体上.我想问的是合成的双链DNA起始部位（即BamHI/XbaI酶切位点之前）没有EcoRI 位点,它是怎么连接到含EcoRI的pCRTM 2.1 上的,谢谢!
答
通过TA系统连接上的,因为PCR末端有产物体A,而pCRTM 2.1 载体上有T,可以通过TA配对而构建的.谢谢，我对这个不是蛮懂，还有一个疑问，就是，引物的5端不就是p出来的产物的5端吗，既然引物5端都是GCT，那A是从哪儿来的呢，谢谢啊，初学，所以有些疑问。