Elisa 辣根过氧化酶

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• western blot和elisa用的二抗相同 为什么显色液不同我们实验室的westernblot和ELISA试验中使用的二抗都是汗HRP标记的二抗,同样的二抗,但是在显色的时候,westernblot使用的是DAB,ELISA使用的是TMB,请问为什么同样都是辣根过氧化物酶标记,但是显色底物要使用不一样的呢?是否仅仅是因为固相载体不同呢?
• 辣根过氧化酶 BR级
• Elisa 辣根过氧化酶
• 请问辣根过氧化酶显色的原理是什么?
• 本人看了很多论坛和资料,大多的elisa都是测未知抗原和抗体,因为我是从植物内混合蛋白质中测出目的蛋白的浓度,我们目前有需检测蛋白的相关抗原、自己免疫的多克隆的一抗和HRP-标记的二抗,是不是我们包被的时候用包被液倍比稀释抗原,并将需检测的蛋白也按照设定的1:20、1:40、1:80、1:160稀释后一起包被过夜?我在想我是不是可以认定我们有的这个抗原则为我们的标准品,然后来检测我们的蛋白.不甚感激~我们目前的设计流程是：1.包被抗原和待测蛋白 4℃过夜（抗原按照倍比稀释加入包被液为:10,5,2.5,1.25,0.625,0.3125,0.15625,0 单位是μg/ml 蛋白1:100稀释都加入)2.第二天弃液,PBST洗板3次,拍干3.每孔加入3％BSA封闭至满孔,37℃湿盒湿育 2h4.洗版,5.每孔加入稀释好的一抗（1:80）100μl,37℃湿盒湿育 2h6.洗版,7.每孔加入辣根酶标记的IgG(1:1000)100ul,37℃湿盒湿育 1h8.9.每孔加入100ul底物反应液（现用现
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