western blot和elisa用的二抗相同 为什么显色液不同我们实验室的westernblot和ELISA试验中使用的二抗都是汗HRP标记的二抗,同样的二抗,但是在显色的时候,westernblot使用的是DAB,ELISA使用的是TMB,请问为什么同样都是辣根过氧化物酶标记,但是显色底物要使用不一样的呢?是否仅仅是因为固相载体不同呢?
问题描述：
western blot和elisa用的二抗相同 为什么显色液不同
我们实验室的westernblot和ELISA试验中使用的二抗都是汗HRP标记的二抗,同样的二抗,但是在显色的时候,westernblot使用的是DAB,ELISA使用的是TMB,请问为什么同样都是辣根过氧化物酶标记,但是显色底物要使用不一样的呢?是否仅仅是因为固相载体不同呢?
答
其实都是HRP催化底物反应,与固相载体无关,他们在反应的整个过程都起到了相同的作用－－供氢体 HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2).供氢体多为无色的还原型染料,通过反应可生成有色的氧化型染...