关于通用测序引物的问题
问题描述：
关于通用测序引物的问题
现在要克隆一段基因,设计引物时,上游加入HindⅢ酶切位点,下游加入KpnI酶切位点.师兄要求再设计一段通用测序引物,用来检测质粒重组时,目的基因片段是否连在质粒上.
那么这个通用测序引物,该怎样设计?是不是针对于HindⅢ和KpnI这两个酶切位点?
答
用质粒上的序列设计引物.不要跨越这两个酶切位点.就是在插入位点的上下游设计引物.这样才是“通用引物”,可以用于所有使用该质粒载体的PCR检测.