PCR中产生的引物二聚体大概是多少bp?

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• PCR体系怎么配PCR was performed in a reaction volume of 25 ll containing PCR reaction buffer (50 mM KCl,10 mM Tris-HCl,2.5 mMMgCl2,pH 8.3),200μMdNTPs,0.2 μM invA primers,0.2μM sefA primers,and 0.5 μM pefA primers,2.5U of Taq DNA polymerase (MBI Fermentas),and 0.2μl of DNA template.这段话怎么翻译啊,这个PCR体系中的10*buffer、dNTP、引物invA、sefA及pefA的体积各是多少,怎么算的啊
• overlap 一、用这对引物A1-F：gggggcccccaggctgacttaccagtccgccacctttgA2- R：gatgacctcctcgcccttgctcaccatggtgcgcgcattggggcgccgggaag扩增出片段A,产物长2540bp左右[color=Red]已割胶回收,即片段A二、用这对引物B1- F：tcttcccggcgccccaatgcgcgcaccatggtgagcaagggcgaggaggtcatcB2- R：cggatatccgatacattgatgagtttggacaaaccac扩增出B片段,产物长1680bp已割胶回收,即片段B三、把一、二步中得到的PCR产物A、B通过overlap PCR连接起来,产物长4200bp左右使用引物：A1-F：gggggcccccaggctgacttaccagtccgccacctttgB2- R：cggatatccgatacattgatgagtttggacaaaccac就在这一步问题出现了,就是这步做了N多次,就是P
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• 做ISSR 的PCR条件优化我想根据这几个做个正交试验 模板浓度,dNTP,引物浓度,taq酶,Mg离子浓度是不是太多了……?退火温度我用梯度PCR基本弄好了,总体积25μl,模板1μl,引物1μl,其它用的是mix跑的,我想问下上面各条件大概范围,比如模板浓度在0.5μl-3μl之间,其它的呢?另外我还想问下ISSR一般条带是多少?我看有的说平均条带在10多条左右,我试过13条引物了最多的才12条带左右多1°C热爱 你说的引物浓度这么低啊？0.2μM/L
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