什么是菌液pcr?
问题描述:
什么是菌液pcr?
答
用来快速鉴定细菌克隆,省掉质粒提取那一步,取少量细菌培养液通过加热破坏后直接做PCR。有时候时直接挑取克隆的一部分直接做PCR,连菌液培养数小时都省了。
如果你做TOPO TA 克隆,手册里面就有挑取克隆直接做PCR的方法。
答
用菌液行PCR还有一个小窍门,省很多事,就是你在挑菌落进行培养时准备1.5ML的EP管,每个管中加入1ML培养基,用接种针挑取菌落接种于EP管中,摇菌几个小时,摇动EP管观察,如果发现有混浊即可用来PCR.我从一开始就用这一方法,非常 成功,省去了准备试管的时间,并且菌液存于有盖的EP管中,用来测序,冻存非常方便.在用接种针接种时很多人担心接种不上,因此反复的挑菌落,其实大可不必,当接种针在来板上无菌落的地方冷确后,轻点菌落一下,然后在EP管中涮一下即可,肯定能接种上.
后来听我们老板说国外实验室在挑细菌克隆时也是用EP管摇菌的,尽管放心的用吧,会成功的.