酶的纯度倍数定义是什么?怎样计算?

酶的纯度倍数=(每次比活力）/（第一次比活力）
其中：比活力＝活力单位数／mg蛋白（氮）=总活力单位数/总蛋白（氮）mg
酶活力(Enzyme Activity)也称酶活性,履指酶催化一定化学反应的能力.酶活性是研究酶的特性,分离纯化以及酶制剂生产和应用时的一项不可缺少的指标.酶活力是用在一定条件下,它所催化某一反应的反应初速度来表示.酶反应速度(指初速度)可用单位时间内单位体积中底物的减少量或产物的增加量来表示.其单位为mol/s.
1.1 酶的活力单位
1.2 摩尔催化活性\分子活性和转化率(催化中心活力)
mol催化活性(Molar Catalytic Activity)表示在单位时间内,酶分子中每个活性中心转换的分子数目.根据米氏方程:
Vmax=Ko[E] Ko=Vmax/[E]
Ko即为转换率(也用Kcat表示),如果每一个酶分子只有一个催化中心,那么催化中心活性等于摩尔催化活性.如果一个酶分子有几个催化中心,那么催化中心活性等于摩尔催化活性除以n.
每种酶的转换率不同.下表列出了几种酶的转换率:
1.3比活力
比活力(性)(Specific Activity)是酶纯度的量度,即指:单位重量的蛋白质中所具有酶的活力单位数,一般用IU/mg蛋白质来表示.一 般来说,酶的比活力越高,酶越纯.
1.4酶活力的测定方法
酶活力与底物浓度,酶浓度,pH,温度,激活剂,抑制剂的浓度以及缓冲液的种类和浓度都密切相关.酶活性测定可用终止反应法或连续反应法.