在酶活力测定中,如何保证测定的是酶反应初速度?

问题描述:

在酶活力测定中,如何保证测定的是酶反应初速度?

保证底物浓度足够大就行了
对于酶就是一级反应

底物量要多,保证对于酶是饱和的,此时酶反应是一级反应,反应速度不会随着底物量而变化,测得就是初速度

有两个方面需要注意:
1.底物 如楼上说的,必须要保证要足够的底物,使酶能完全发挥其催化功能.
2.时间的控制 根据酶促反应曲线可以看出,最开始曲线斜率比较大,然后趋于平缓(这种原因可能是生成的产物促进逆反应或是酶失活),由此,如果测定的时间选择不当的话,测的速度也不是初速度,所以在测定的时间必须掌握在曲线斜率比较大的那段时间内.
当然,除这些之外,需给酶提供最适温度、最适PH,保证没有抑制剂存在.