酶活计算如果这样一道题目:1ml总反应体积中,有10ul的酶(13ug),在2min内的吸光度变化为0.04,摩尔消光系数是4500L/mol.cm光径是1cm ,定义酶活单位为每分钟生成1umol产物需要的酶量为一个酶活单位 .试计算该酶的酶活力!麻烦各位把具体步骤写清楚,顺便带上单位吧,小弟对此真的很不懂我觉得 lcy19712008答案和我想的差不多原酶液的浓度应该和酶活单位没多大关系吧我只想求酶活单位 是不是到4.4umol/min就可以了

问题描述:

酶活计算
如果这样一道题目:
1ml总反应体积中,有10ul的酶(13ug),在2min内的吸光度变化为0.04,摩尔消光系数是4500L/mol.cm
光径是1cm ,定义酶活单位为每分钟生成1umol产物需要的酶量为一个酶活单位 .试计算该酶的酶活力!
麻烦各位把具体步骤写清楚,顺便带上单位吧,小弟对此真的很不懂
我觉得 lcy19712008答案和我想的差不多
原酶液的浓度应该和酶活单位没多大关系吧
我只想求酶活单位 是不是到4.4umol/min就可以了

浓度×摩尔消光系数×光径=吸光度变化。
你看纲量就知道该怎么算了。
浓度变化就是0.04除以光径再除以摩尔消光系数等于8.89e-6mol/L
一分钟内就是4.44e-6mol/L
1ml的话就是有4.44e-9mol
也就是4.44e-3μmol
10μl的酶一分钟能产生4.44e-3μmol的产物
那么1μl酶能产生4.44e-4μmol的产物
1除以4.44e-4μmol就是生成1μmol产物所需的酶量
答案是2252

酶量/底物变化率
min*ul/umol

加入的总酶活为 (0.04/2)/0.0045=4.4(umol/min)
0.04/2是每分钟的吸光度变化,再除以0.0045是换算成umol,就是你的酶活单位了.
原酶液浓度为 4.4/10=0.44 u/ul.
如果要算比活,再除以蛋白浓度.