请问,测定蛋白质相对分子质量各方法的优缺点,谢谢测定蛋白质相对分子质量方法优缺点
问题描述：
请问,测定蛋白质相对分子质量各方法的优缺点,谢谢测定蛋白质相对分子质量方法优缺点
答
用离心方法分离
和亚细胞物质的基本原理是根据它们在液体介质中或者沉降速度不同而形成不同的区带,或者它们的密度不同而停留在液体介质中不同的位置而把它们一一分开.
前者是沉降速度法,应用该法时液体介质的最大密度要小于样品中最小颗粒的密度,离心时选用高转速和短时间；后者是沉降平衡法,应用该法时液体介质的最大密度要大于样品中最小颗粒的密度,离心时选用较低转速和较长时间.
如果测蛋白质的相对分子量可用速度区带(或速度梯度)离心
本法是将样品放在一个连续的密度梯度液体上,通过离心,大分子量蛋白质沉降快,小分子量沉降慢.经过一段时间,相同分子量的蛋白质就在同一深度形成一条
,因此把各种分子量大小分开来.它适用于分离密度相同、而大小不同的物质,蛋白质组份密度都差不多,但分子量不一样,用本法很容易将其分开.但对密度不同、大小类似的物质则不易分离.
蔗糖梯度是一种常用的介质.用不同浓度的蔗糖溶液(5%-60%)配成梯度,用于梯度离心.再分别进行收集处于不同区带里的各个组份.