琼脂糖凝胶电泳时如果提取的DNA中含有蛋白质和RNA污染应如何解决?
问题描述:
琼脂糖凝胶电泳时如果提取的DNA中含有蛋白质和RNA污染应如何解决?
答
蛋白污染可以考虑用酚氯仿多抽提几次,记得吸上清的时候小心点,宁可浪费也别吸到界面.一般后续还需要用氯仿/异戊醇抽提来去除酚.这样基本蛋白污染就可以去干净.实在不行,抽提一次后,就用蛋白酶K消化30min,再抽提.
如果DNA多,RNA污染就添加RNase A消化,你可以中途取少量跑胶检测,RNA去干净了再抽提,再沉淀DNA.