固态铬黑T配制出来是什么颜色?

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• SDS-PAGE跑了4、5回了,条带颜色总是特别浅看不清楚,连MARKER都看不清楚,是怎么回事啊?连着练了好几天了,每次都不出结果,用相同的样品在别人制的胶上面跑出来就看的清楚,不知道制胶的时候什么最影响条带深浅啊这两天又跑了好几次，没有一次成功，都是条带颜色浅。重新配制了分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液，APS也是新配的。样品是昨天新制的，跑出来还是颜色浅，MARKER分别用了两种，颜色都很浅。染色液是考马斯亮蓝，昨天也新配了。真不知道是什么原因了。有一点，我用别人的分离胶缓冲液的时候，分离胶跑1小时就到头了，用我自己配的要跑1个半小时，不知道和条带颜色浅有没有关系，条带形状是正常的。
• 可以用有硬度的水配制测硬度的氨氯化铵缓冲液吗?测出来的硬度准确吗?溶液1、 20g氯化铵溶于500ml高纯水中,加入150ml浓氨水中溶液2.取5gNa2MgY放入100ml高纯水中，加入氨盐缓冲液（溶液1 ） 5ml，2 滴铬黑T，（如此时溶液呈现兰色，加入微量的硫酸镁使呈紫红色），用EDTA滴定至兰色。合并溶液1、2定容到1000ml，如合并后又呈紫红色，取50.00ml测定其硬度,向其余950ml缓冲液中加入EDTA，抵消其硬度。这个配制方法中的最后一句指的是抵消哪的硬度，水的硬度可以抵消吗？我们用不确定硬度的水配制出的药品测量配药时用的水的硬度为10umol/l，这个结果会准确吗？结果大约能相差多少？
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