酶的分离纯化一般经过哪些步骤?应注意哪些问题?

问题描述:

酶的分离纯化一般经过哪些步骤?应注意哪些问题?

酶是一种特殊的蛋白质,在分离纯化过程中需要注意温度以及PH值等的控制,注意在纯化过程中所使用的缓冲溶液的离子强度的控制(常用PBS缓冲溶液),在实际纯化过程中,一般要在低温冰箱中进行,缓冲溶液中注意加入EDTA二钠盐(1-5mM)螯和重金属离子一般避免酶失活.常用分离步骤包括分子筛层析、离子交换、疏水层析等步骤.