为什么紫外测定蛋白含量时以bsa为标准蛋白
问题描述：
为什么紫外测定蛋白含量时以bsa为标准蛋白
使用酶标仪测定蛋白含量,利用蛋白与g250反应物的吸光值测定蛋白含量,标准曲线为什么用bsa绘制?
答
紫外吸收法
原理
大多数蛋白质由于有酪氨酸和色氨酸的存在,在紫外光280nm有吸收高峰,可以进行蛋白质含量的测定.但是核酸在280nm也有吸收,干扰测定,不过核酸的最大吸收峰在260nm.Warburg等测定了酵母烯醇酶和酵母核酸在280nm和260nm时A的比值,然后通过计算消除核酸存在的影响,可以求得有核酸存在时蛋白质的浓度.样品不需要经过预先处理,即可直接进行测定.方法简单而快速,又不损害样品中的蛋白质,测定之后的样品仍可作他用.样品中有硫酸或其他盐类存在也不影响测定.在柱层析分离酶或蛋白质时,常为人们所采用.
该方法是以酵母烯醇酶蛋白和酵母核酸为标准建立计算公式,而不同蛋白质的氨基酸组成也不同,因而光吸收也不尽相同,这就会带来误差.