考马斯亮兰法绘制标准蛋白曲线时,用1.0mg/ml和0.1mg/ml标准蛋白溶液测得的吸光度有重叠如何确定蛋白浓度?
问题描述：
考马斯亮兰法绘制标准蛋白曲线时,用1.0mg/ml和0.1mg/ml标准蛋白溶液测得的吸光度有重叠如何确定蛋白浓度?
0.1mg/ml标准蛋白溶液所测吸光度 R2=0.9983 y=2.2628x-0.0006
0 0
0.01 0.021
0.02 0.043
0.04 0.094
0.06 0.136
0.080.174
0.10.229
1.0mg/ml标准蛋白溶液所测吸光度 R2=0.9978 y=0.8249x+0.0044
00
0.10.097
0.20.176
0.4 0.329
0.6 0.494
0.8 0.641
1 0.851
用0.1和1mg/ml标准蛋白溶液所测吸光度理论上应该不会用重叠的部分,但所测的数据出现了,对于在吸光度在0.097-0.229之间的浓度如何确定,用哪个关系式?我的邮箱是chiqinstudy@163.com,请各位帮帮忙,谢谢!
答
你加入的试剂的量是否一样,比如考马斯亮蓝的体积之类的.考马斯亮蓝的体积是一样的，其他试剂的体积严格按照表中用移液器加入的个人觉得如果你的步骤完全正确，那么吸光度在0.097-0.229之间，你取两个标准曲线中的任何一个算出来的结果应该都是正确的，而且应该两个数差不了多少。随意一个数代入两式，数值相差较大，所测的OD值有重叠可能有哪些原因？麻烦您了，谢谢！