我想请教一下有关蛋白质的考马斯蓝染色方面的问题

我想请教一下有关蛋白质的考马斯蓝染色方面的问题
本人在做WB实验,先做蛋白质的考马斯蓝染色定量,近一个月了,只有一次染色出条带来,其余每次都是成瀑布状,分离胶顶端蓝片,下面无带,后经多次询问 怀疑是样品中存在沉淀,之后就多次离心,发现确实有沉淀,别人拿我的样品做出来了,我照着她做却屡次不出来,电压的问题都排除过,还是不出来,目前跑出来的是从上到下模糊状 没有明显条带 依稀有一两条还勉强好点,不明白是什么原因,