我想问一下荧光定量PCR法用2-△△Ct计算相对定量的问题
我想问一下荧光定量PCR法用2-△△Ct计算相对定量的问题
结果出来的都是多少多少倍数,而且对照组又设的是1,这该怎样进行统计啊,我看人家的表都是x¯±s形式的,怎么才能弄出这样的形式啊,麻烦能不能给我举个例子详细说一下啊
你一次实验做的数据,内参可以得到几个CT值,目的基因也会得到几个.这样的话,根据平均的CT值,就会得到一个倍数(相对量).
实验肯定不会只做一次吧,至少重复3次以上.这样就会得到3个以上的倍数了.3个以上的数值就可以算均数和标准差了.我想问一下,三次重复之后实验组都是多少多少倍的,可以算均数和标准差,可是对照组呢还是设的都是1啊,那做统计分析比如t检验的话,那不能用实验组的数据和1做检验吧,我就是这不太懂,对照组的1怎么做检验啊,怎么把对照组的1也变成均数和标准差的形式啊,如果方便的话能不能跟我QQ联系啊,我的QQ号:674904291,我真的很需要您的帮助,谢谢,对了,还想请问一下,△Ct值是不是与mRNA量成反比的呢?均数和标准差都是算目的基因的倍数的。因为对照组都设为一。如果要把对照组也表现为均数和标准差,可以这么做:把一次实验对照组的CT值取一个均数,然后每个样本针对这个均数算相对量(倍数)。这样就可以得到对照组的一组相对倍数了,可以计算均数和标准差了。△Ct值只是一个相对值,代表RNA含量的差别,并不代表RNA含量你是说把一次实验对照组设为1,然后三次重复实验所有的样本都针对这个设的1算出相对量来,另外两次实验的对照组也针对这个设的1算出相对量来,就是不把三次实验的对照组都设出1来,就设一次实验的对照为1,然后把三次实验所有的样本都对照这一个1算出相对量,是这个意思吗不是的。每次试验的实验组当然是核自己的对照组算相对值了。你怎么会那么想。你要算对照组的均数和标准差,这个时候就只算对照组的,把所有对照组的放在一起算,不考虑实验组。所有对照组的均数设为一,然后每个具体的值和这个均数算相对倍数