PCR扩增时RNA引物序列设计时,引物序列是与目标基因前的序列互补呢,还是与目标基因互补?
问题描述：
PCR扩增时RNA引物序列设计时,引物序列是与目标基因前的序列互补呢,还是与目标基因互补?
就是说引物序列与目标基因是否有交叉?
如果引物是和其始、终止序列互补设计，而不是与目标基因的前后序列设计，那么当我们最后酶切除引物的时候，基因的序列不就不完整了吗？
答
特定的引物决定了所扩增的DNA片断.引物是人工合成的短DNA片断,一般不超过50个碱基(通常18－25个),它们与所要扩增的DNA片断的起始和终止区域完全互补.在“退火”时引物结合于DNA模板的起始和终止点,DNA聚合酶结合到这两个位置,开始合成新的DNA链.
(在DNA双链分离后,降低温度使得引物可以结合于单链DNA上叫"退火")