怎么用可见紫外分光光度计测定样品?

第一步,知道你所需要测量物质的特征吸收波长是多少?这个可以在国家标准、行业标准或其他相关标准或方法.例如测量总氮的话,就需要220和275nm这2个波长,所以必须买紫外的光度计,并且最好带双波长测定功能,例如测总磷是697nm,只需买台可见光度计就可以了.
第二步,知道所测量的物质的实验方法,需要哪些仪器和设备,还有玻璃器皿等,同时还有比较完成测量所需要的所有化学试剂等.这个可以在标准或实验方法中找到,基本在互联网上都可以找到电子版的测量方法.
第三步,配置好所需测量物质的标准浓度溶液,一般是5-8个标准溶液,浓度建议从高到低,建议每个不同浓度贴上标签,以防顺序搞错.注意,部分实验需要往标准溶液中加显色剂之后才可以用光度计进行测量.
第四步,设置好光度计的测量波长,这就需要熟悉光度计的基本操作,一般测量物质的浓度都是用的标准曲线法,就是对应光度计中的定量测量功能.具体操作时第一步,把仪器的波长调整到我们所需要的波长,例如测量总磷直接把波长走到697nm,之后放入装好蒸馏水的比色皿到样品室做空白,就是熟称的调零.第三部把标准溶液放入样品室,依次测量他们的吸光度,仪器一般会自动记录之后就会给出标准曲线方程,实验完毕.如果仪器不能直接记录吸光度,可以先记在笔记本上,之后用excel软件进行计算标准曲线.判断做出的标准曲线是否能用,看哪个R值即那个相关系数,一般最少做出0.999就可以用了,差一点的仪器也可以做出0.99.
第五步,把未知样品放入样品室就可以直接测量出样品浓度.