我要对脂肪酸标准品进行甲酯化后再气相色谱测定,遇到的问题是:要配成一定的浓度(1mg/ml),怎么计算?参考的甲酯化方法如下:“总脂用10mL甲醇溶解后转移至分液漏斗中,用15mL正己烷分三次洗涤,所得甲醇溶液转移到大试管中,加入4mLp(KOH)=1%KOH的甲醇溶液,60℃水浴加热15min,冷却后加入5滴p(BF3)=20%的BF3乙醚溶液,静置l0min酯化.酯化后的样品加入5mL的重蒸正己烷和10ml水,分去水溶液,有机层用10mL水洗涤.取2.0ml的有机层加入一定量的硅胶,不振荡静置2.0min.取20.0uL的有机层加入到含有1.0mL正己烷的具塞试管中备用,作为进行气相色谱分析的样品.”这个方法是否可行?可行的话,我要称取多少脂肪酸标准品的量进行?上面方法中的试剂的量是否合适?最后取20ul有机层用1ml正己烷定容,这是不是就是最后脂肪酸甲酯化后的浓度?怎么计算他的浓度是多少?拜托,帮忙一下,第一次做色谱,自己老师也不懂!

问题描述:

我要对脂肪酸标准品进行甲酯化后再气相色谱测定,遇到的问题是:要配成一定的浓度(1mg/ml),怎么计算?
参考的甲酯化方法如下:“总脂用10mL甲醇溶解后转移至分液漏斗中,用15mL正己烷分三次洗涤,所得甲醇溶液转移到大试管中,加入4mLp(KOH)=1%KOH的甲醇溶液,60℃水浴加热15min,冷却后加入5滴p(BF3)=20%的BF3乙醚溶液,静置l0min酯化.酯化后的样品加入5mL的重蒸正己烷和10ml水,分去水溶液,有机层用10mL水洗涤.取2.0ml的有机层加入一定量的硅胶,不振荡静置2.0min.取20.0uL的有机层加入到含有1.0mL正己烷的具塞试管中备用,作为进行气相色谱分析的样品.”这个方法是否可行?可行的话,我要称取多少脂肪酸标准品的量进行?上面方法中的试剂的量是否合适?最后取20ul有机层用1ml正己烷定容,这是不是就是最后脂肪酸甲酯化后的浓度?怎么计算他的浓度是多少?拜托,帮忙一下,第一次做色谱,自己老师也不懂!

楼主最终测定的应该是脂肪酸的含量 不是脂肪酸甲酯的含量呀
定量的话以脂肪酸标准品定量就行了!
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