反转录PCR引物如何设计?已经得到cDNA第一链,引物设计是以cdna为模版,设计上下游引物吗?
问题描述:
反转录PCR引物如何设计?已经得到cDNA第一链,引物设计是以cdna为模版,设计上下游引物吗?
cDNA不是只有一条链吗,是不是只需要一条引物?求详解.
答
不,需要两条,因为随着你PCR的进行,另一条互补链会被引物扩增出来,因此你需要两条引物都加进去.那么我引物设计的时候,是不是以mRNA为模版与以CDNA为模版设计的引物都可以?都可以,别忘记是T不是U。