苯酚硫酸法测定葡萄糖的标准曲线,以及具体方法!
问题描述:
苯酚硫酸法测定葡萄糖的标准曲线,以及具体方法!
答
标准液的制法:取100mg葡萄糖(104℃烘干至恒重)在100ml的容量瓶定容.分别取溶液1ml、2ml、3ml、4ml、6ml、8ml至100ml的容量瓶中,制成10ug/mg、20、30、40、60、80ug/mg的标准液.
苯酚溶液的制法:称取5g的苯酚,加入95ml蒸馏水,溶解.
反应液:分别取1ml的标准液,加入1ml的苯酚溶液,迅速加入5ml的浓硫酸,震荡摇匀.在沸水浴中加热15min后冷却到室温,在490nm波长下测定其吸光值.
我这两天刚做出来的,但是我的浓度是用的20ug/mg、40、60、80、100、120,其他的细节都是一样的.我只是按照我做的给你说的,你也可以灵活变通,比如沸水浴的时间,波长的选择都是按照自己的实验具体确定的,但是还是有些细节不能忽视的,比如苯酚要求用182℃蒸馏后得到的馏分,如果试验经费允许可以直接买重蒸酚,普通苯酚和重蒸酚价格相差有点大.具体我们可以讨论,我也是试验很多方法自己总结出来的,用苯酚测定糖是个技术活,而且冒着有毒的危险.