mRNA反转录引物的问题?
问题描述:
mRNA反转录引物的问题?
对于动物的mRNA有一个长长的poly(A)尾,而我们用的oligo dt 引物有一个长的T结构,与polyA的尾部结合,在反转录酶的作用下,使mRNA反转成cDNA,我想问问下,oligo dt与poly(A)尾结合时,是与poly(A)尾的靠近5'端一侧结合,还是与靠近3'端的一侧结合.
因为poly A尾很长,oligo dt的T短,它与poly A的哪端结合呢?
答
与3’端结合,因为新链的生成(不管是DNA复制、转录还是反转录)都是由5‘端向3’端进行的,只有引物与模板的3‘端结合,才能保证新链由5’端向3‘端生成.