20微升pcr反应体系各种反应物分别应该加多少
问题描述：
20微升pcr反应体系各种反应物分别应该加多少
答
最好根据Taq酶的说明书做
答
10Xbuffer: 2ul;（含镁离子，如不含的话另外加MgCl2到终浓度10-20mM ）
2.5mM dNTP: 0.6ul(我喜欢用的，公司一般都默认推荐用0.2uM，也就是1.6ul，个人感觉太多)
10uM Primer：0.4 ul（这是一对混合在一起的，也可以分开加）
10u/ul Taq ：0.2 ul
Template：菌液1ul（我是跑菌落PCR，要按照你的模板浓度来加，一般质粒5-30ng就足够，genome 要100ng以上）
ddH2O: 15.8ul (补足20ul)
不过第一次做还是建议你按所买酶上的说明书来做，做不出来，还可以找他们，呵呵
答
10×扩增缓冲液 2ul,4种dNTP混合物 各200umol/L 2ul,引物各10～100pmol 0.5ul,模板DNA 0.2ug,Taq DNA聚合酶0.2ul,Mg2+1.5mmol/L 1.5ul,加双或三蒸水至20ul.