高效液相色谱梯度淋洗中溶剂极性顺序如何?高效液相色谱其反向色谱中,极性大的物质先被流出,极性小的后流出.那么在进行梯度淋洗时候,淋洗液极性如何选择呢?是先选择极性大的配比还是像正向色谱一样,先选择极性小的,后极性大的溶剂呢?请赐教.
问题描述：
高效液相色谱梯度淋洗中溶剂极性顺序如何?
高效液相色谱其反向色谱中,极性大的物质先被流出,极性小的后流出.那么在进行梯度淋洗时候,淋洗液极性如何选择呢?是先选择极性大的配比还是像正向色谱一样,先选择极性小的,后极性大的溶剂呢?请赐教.
答
对于反相的HPLC,梯度洗脱的流动相是有机相比例从小到大,水从大到小.作为方法建立,可选择如下步骤：1.乙腈-水（0：100）-（100：0）,没有选甲醇的原因是甲醇-水粘度大（尤其在与水大概55：45时）,这样如果可以换等度...