PCR克隆中GC含量高如何扩出?
问题描述：
PCR克隆中GC含量高如何扩出?
答
在反应Buffer中加一定含量的DMSO或DTT，可以减少模板二聚体的形成。
答
1）一般的公司有提供专门扩增高GC序列的酶和buffer提供,可以考虑,我们用宝生物的LA酶和GCbuffer
2）可以将序列扩增长一些,避免引物GC含量过高的区域,2步克隆
3）反应中加入DMSO等改进方法也是可行的,但对GC>75%的可能没有效果的
4）序列不长的话,可以考虑人工合成