PCR产物是单带,切胶回收纯化后,使用ABI3730进行测序,为什么测序没有反应呢?目的片段是120bp.我只是想知道为什么,至于解决方法,呵呵,我已经重新设计引物了。样本太多,一共200多个,建克隆会疯掉的,不过,呵呵

问题描述:

PCR产物是单带,切胶回收纯化后,使用ABI3730进行测序,为什么测序没有反应呢?目的片段是120bp.
我只是想知道为什么,至于解决方法,呵呵,我已经重新设计引物了。样本太多,一共200多个,建克隆会疯掉的,不过,呵呵

建议做单克隆后再测序。

说明你回收的损失太大,浓度低自然测不出来。可以连T转化后再用小提质粒测序。

切角回收的损失很大,纯化方法换一个吧,目的条带很短的话他测出来的结果也没有多少可用的,能有几十BP的结果就不错了.最好你换一个引物重新设计,片段延长一点