能不能用PCR直接扩增目的片段,然后转入表达载体,代替在克隆载体或dh5a中的扩增

问题描述:

能不能用PCR直接扩增目的片段,然后转入表达载体,代替在克隆载体或dh5a中的扩增

可以,只要你的PCR扩增特异性够强,没有杂带.这其实就是理论和实际的差距,因为表达载体的扩增效率低,如果一次实验不成功,你还要从PCR步骤做起重新收集DNA,而如果克隆至扩增载体,每次只需扩增质粒回收DNA即可.