为什么构建基因文库?直接从生物体内提取不行吗
问题描述:
为什么构建基因文库?直接从生物体内提取不行吗
答
当然不能直接提取。
基因是一个人为概念,但从分子角度上看,基因与非基因没有分子水平的差异。而我们要操作分子,必须找到目标靶序列。所以,不可能直接提取任何一个基因,只能通过探针或者其他方式找到基因,并作相应的处理。使之可以识别。
另外,不同基因在体内的拷贝数和表达频率差异都很大,例如指导胚胎发育的基因在成体内不表达,不可能从成体体内找到其表达产物,也就无法定位该基因,而例如核糖体DNA之类的基因,表达活跃,拷贝数多,它们往往掩盖了低丰度基因的检测。所以必须构建基因文库,使得高丰度与低丰度的基因都能被覆盖并检测到。
最后,理论上,可以直接提取,但是实际和理论是由很大差异的。所以人们才构建许多方法以达到要求。所以不能光因理论可行,就忽略实际情况。
答
构建基因文库是获取目的基因的方法之一,并不是惟一的方式.如果所需要的目的基因序列已知,就可以通过PCR方式从含有该基因的生物的DNA中,直接获得,也可以通过反转录,用PCR方式从mRNA中获得,不一定要构建基因文库.但如果所需要的目的基因的序列完全不知,或只知道目的基因序列的一段,或想从一种生物体内获得许多基因,或者想知道这种生物 与另一种生物之间有多少基因不同,或者想知道一种生物在个体发育的不同阶段表达的基因有什么不同,或者想得到一种生物的全基因组序列,往往就需要构建基因文库.