荧光定量PCR的前试验准备及流程首先是获取菌体,再提总RNA,然后分离mRNA,之后进行RT-PCR,还是可以直接进行荧光定量PCR呢?
问题描述:
荧光定量PCR的前试验准备及流程
首先是获取菌体,再提总RNA,然后分离mRNA,之后进行RT-PCR,还是可以直接进行荧光定量PCR呢?
答
要反转成CDNA才能进行RT-PCR
答
一般来讲,是获取菌体,提总RNA,分离mRNA,进行逆转录,再进行荧光定量PCR。
答
首先是获取菌体,再提总RNA,不用再分离mRNA,直接做反转录RT-PCR,得到cDNA后直接进行荧光定量PCR.
得到的得到cDNA可以保存的时间比较长.这样荧光定量PCR就可以集中一起做.
答
提出总RNA,直接反转录RT成CDNA进行荧光定量PCR,基因定量分析。