请问谁能具体解释一下巢式PCR法?
问题描述:
请问谁能具体解释一下巢式PCR法?
答
先设计一个扩增子片段大的引物进行扩增(比如500bp),再设计一个包含于前一个扩增子之内的引物(比如200bp)将前一个扩增子为模板进行二次PCR扩增,这样会提高PCR的灵敏度。比如说你有一段1000bp的靶序列,第一次扩增子包含第200到700位点,那么第二次PCR从第300到500位点,前一对引物叫外引物,后一对叫内引物。叙述能力比较差,希望能帮助你。
答
就是多重PCR,第一次获得产物浓度不够,但循环数过多会造成产物质量不好,就会以第一次PCR产物为模板,设计内引物进行第二次扩增,获得高质量产物