DNA生物复制与PCR技术的异同

问题描述:

DNA生物复制与PCR技术的异同

异:1模板DNA的变性:模板DNA经加热至94℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;DNA复制则是靠解旋酶解旋。
2模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至40~60℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;DNA复制是在体内进行,温度应该和生物的体温相同,由游离的脱氧核苷酸和母链配对。
3引物的延伸:DNA模板--引物结合物在DNA聚合酶的作用下,于72℃左右,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。DNA复制靠DNA聚合酶把脱氧核苷酸聚合成DNA链。
4重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。DNA的复制速度比较慢。
同:两者均遵循碱基互补配对原则。

根据我的实验经验,两者的区别是这样的:
1.生物复制时间比较长,一般需要过夜培养细菌之后才可以提取DNA;而PCR在30个循环之后(最多两小时)即可得到大量DNA片段。
2.生物复制为细菌内复制,一般会被细菌甲基化;而PCR得到的DNA不带甲基化。

楼主可以看下这个表呵,希望可以帮到楼主.PCR技术 DNA生物复制环境 体外复制,加热,90摄氏度左右 体内,温和的环境模板 DNA单链 DNA单链原料 4种脱氧核糖核苷酸 4种脱氧核糖核苷酸酶 主要是DNA聚合酶 DNA解旋酶,DNA聚合...

一个是在体内进行的,一个是在体外进行的;PCR复制DNA片段的速度要快的多。