关于PCR产物的理解既然CDNA无内含子和外显子的区别,那么以它为模板扩出的目的基因的序列不就也没有内含子和外显子的区别,那扩增的这个基因不就错了吗?请问我这么理解哪里出错了?请不要复制大片的文章,
问题描述：
关于PCR产物的理解
既然CDNA无内含子和外显子的区别,那么以它为模板扩出的目的基因的序列不就也没有内含子和外显子的区别,那扩增的这个基因不就错了吗?请问我这么理解哪里出错了?
请不要复制大片的文章,
答
那你为什么不用genomic DNA为模板进行扩增呢？
答
扩增出来的基因错与不错取决于您所使用的引物，只要与模板结合又不是非特异扩增的话，扩增产物就不会有错
答
既然CDNA无内含子和外显子的区别,那么以它为模板扩出的目的基因的序列不就也没有内含子和外显子的区别,“那扩增的这个基因不就错了吗?”你最后一句引号中的话有问题.这个基因的确根基因组上的序列不一样了.但是它所...
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如果你的样品中只有cDNA的话，当然是只含有外显子片段的。但是，cDNA是由RNA逆转录得到的，而严格的讲，现在市场上提取RNA的试剂不能100%保证无基因组DNA污染，也就是你最后得到的cDNA里面是有基因组DNA的。
所以设计引物的时候就要考虑引物扩增跨两个外显子以上，这样就可以避免扩增出含有内含子的基因组DNA了。