载体构建酶切位点的问题
问题描述：
载体构建酶切位点的问题
18—T克隆载体与目的基因连接后,送去测序,Blast之后得到序列,上面含有下一步的酶切位点,请问,目的基因序列包括酶切位点序列吗,师姐说不包括.酶切位点是PCR时加入引物扩增上去的,是这样的么
答
首先,这个问题存在逻辑颠倒的毛病.
酶切位点的选择一定是要避开目标片段内包含的位点,因为如果不避开到时候酶切就会把目的片段切开.在目的片段和载体之间的酶切位点都是扩增引物带入的.