请问在PCR实验中,如果不知道模板DNA的核酸序列的情况下如何设计PCR引物?最近一直在学PCR.

问题描述:

请问在PCR实验中,如果不知道模板DNA的核酸序列的情况下如何设计PCR引物?
最近一直在学PCR.

一般来说,RT-PCR的时候很多情况下会不知道模板DNA的序列,可以在Genbank中寻找和你要扩增的物种的亲缘关系较近的物种的同源基因,多找几种,用DNAMAN或其他软件可以比对它们的序列,这样可以得出这种基因在进化过程中的保守序列,根据这个保守序列设计引物来PCR,扩增出来的机率就大多了.