求PCR,PCR获得的目的基因中含有SalI酶切位点,而引物也引入了salI位点,现在一双酶切就切出来3条带,
问题描述:
求PCR,
PCR获得的目的基因中含有SalI酶切位点,而引物也引入了salI位点,现在一双酶切就切出来3条带,
答
你先说一下SaII酶切的目的,是构建到载体上还是别的目的,如果构建到载体上的话,基本没戏了,重新设计引物吧
答
没法往下做。重新设计酶切位点和引物
答
重新设计引物,把酶切位点给换掉.这是最保险也是最简单的方法.还有一种就是半酶切方法,做一个test,减少酶量,缩短酶切时间,这样就会有几种情况出现,至少会出现你需要的片段,这就要你去找合适的酶量和酶切时间.