常用蛋白质提取缓冲液有哪些
问题描述:
常用蛋白质提取缓冲液有哪些
答
1.SDS:强烈,可以把疏水性蛋白也充分提取出来,如膜蛋白
2.尿素:有膜蛋白的损失
3.RIPA:用于磷酸化蛋白的温和裂解,不破坏磷酸基团1.4% SDS、2% DTT、120mM Tris-Cl (pH 6.8)、蛋白酶抑制剂(Cocktail)2.尿素7M,硫脲2M,DTT 20mM3.20mM Tris pH 7.5,1.5mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA,1% Triton X-100, 2.5 mM 焦磷酸钠 ,1mM β-Glycerophosphate, 临用前加入蛋白酶抑制剂,每ml裂解液中加入100mM PMSF 10ul,10mg/ml leupeptin 1 ul, 1mg/ml aprotinin 10 ul,1mM 钒酸钠