DNA重组技术为什么要用到DNA复制啊,还有,T-DNA是什么?标记基因是什么?

重组之后你需要复制重组的质粒或者DNA,所以需要DNA 的复制..一般作为载体的质粒都有原核或者真核的复制起点.
T-DNA是存在于农杆菌质粒上的一段DNA,这段DNA对于农杆菌自身非必需,由于这段序列在农杆菌侵染宿主时能整合到宿主基因组DNA中,人们利用这一特性,在转基因过程中使用农杆菌转化.即将农杆菌T-DNA序列替换为目的基因,利用农杆菌将其转入到宿主中(只对植物有用)..
标记基因,可想而知就是作为标记的一个基因..我们将重组DNA转入目的宿主中,如何检测其是否转入到宿主中?这就需要标记基因了,标记基因一般为抗性基因,或者一些必需营养因子等.植物中常用的如潮霉素抗性基因,卡那霉素抗性基因.微生物中常用安苄抗性.卡那霉素抗性,以及蓝白斑筛选,或者像酵母中用编码必需氨基酸的基因作标记基因..简言之,标记基因就是用作标记重组DNA是否转入目的宿主中.但是单纯的标记基因不能完全确定重组DNA是否转入宿主中.通常还需要其他一些检测手段配合使用,以确定标记基因是否转入宿主中.简单的说,标记基因是连在目的DNA分子上的,标记基因随着目的基因一同转化...就抗性基因而言,宿主本身不会有比如潮霉素抗性,但如果重组DNA分子转入了宿主中，随着抗性基因的表达，宿主产生了潮霉素抗性，这样的话，我们在培养基中加入潮霉素，就可以筛选出重组DNA导入了的阳性转化体。同理，营养物质也是一样的，比如重组DNA中含有编码His的基因，宿主本身无法在缺少His的培养基中生长，但是如果重组DNA整合到宿主中，那么宿主就表现出能在缺少His的培养基上长，所以同过利用缺少His的培养基就能筛选出阳性的转化体。可能上面说是检测不太准确，应该是筛选更好。此外，我也不太确定这里用宿主是否恰当，不过能理解就好~~