DNA的分离和纯化的问题!首先向问一下:在纯化过程中氯仿-异戊醇是如何去除蛋白质的,然后是在DNA沉淀的时候为什么要加冷的乙醇,接下来是关于SDS市怎样让dna与蛋白质分离的,还有就是RNase是蛋白质酶,还是RNA酶,以及在使用紫外分光光度时A260/A280=1.8即表明RNA已被除净,蛋白质的含量不超过0.3%是为什么!
问题描述:
DNA的分离和纯化的问题!
首先向问一下:在纯化过程中氯仿-异戊醇是如何去除蛋白质的,然后是在DNA沉淀的时候为什么要加冷的乙醇,接下来是关于SDS市怎样让dna与蛋白质分离的,还有就是RNase是蛋白质酶,还是RNA酶,以及在使用紫外分光光度时A260/A280=1.8即表明RNA已被除净,蛋白质的含量不超过0.3%是为什么!
答
氯仿除去蛋白:氯仿是非极性分子,水是极性分子,当蛋白水溶液与氯仿混合时,蛋白质分子之间的水分子就被氯仿挤去,使蛋白失去水合状态而变性.经过离心,变性蛋白质的密度比水的密度为大,因而与水相分离,沉淀在水相下面,...