用紫外吸收法测定DNA含量,如何根据光吸收值求DNA的含量?
问题描述:
用紫外吸收法测定DNA含量,如何根据光吸收值求DNA的含量?
答
可以先利用已知各浓度的DNA的溶液测出其对应的吸光值,然后做出标准曲线。再测未知液的吸光值,对照标准曲线就可以求出未知液中的DNA浓度。DNA 的最大吸光值在波长260nm处
答
DNA和RNA的量,据朗波-比尔光吸收定律A=-lgT=εbc知测量样品的浓度为c=A/εb,又知ε=0.020,在b=1cm的情况下,c=A/(0.020×1)=50×A,则未稀释的样品的浓度为50×A×稀释倍数(μg/mL)=50×A×稀释倍数/1000(mg/mL)
建议看一下参考资料的链接~是百度文库上的一个文档。
答
您好!
① 1个OD260相当于50ug/ml DNA.
② 紫外吸收法测定DNA含量,OD260/OD280=1.8-2.0之间时,DNA纯度较好;<1.8说明有蛋白污染,>2.0说明有RNA污染,此时测定的OD260值不能用来定量.
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