质粒作为基因工程载体的优点

问题描述:

质粒作为基因工程载体的优点

:(1)具有较小的分子量.经验表明,为了避免在DNA的纯化过程中发生链的断裂,克隆载体的分子大小最好不要超过10Kb.pBR322质粒这种小分子量的特点,不仅易于自身DNA的纯化,而且可容纳较大的外源DNA片段;(2)具有两种抗菌素抗性基因可供作转化子的选择记号,能指示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞以及外源DNA分子是否插入载体分子形成了重组子.标记基因往往可以赋予宿主细胞一种新的表型,这种转化细胞可明显地区别于非转化细胞.当我们把一个DNA片段插入到某一个标记基因内时,该基因就失去了相应的功能.当把这种重组DNA分子转到宿主细胞后,该基因原来赋予的表型也就消失了.要是仍保留了原来表型的转化细胞,细胞内含有的DNA分子一定不是重组子.很显然,既要指示外源DNA是否进入了宿主细胞,又要指示载体DNA分子中是否插入了外源DNA片段,那么这种载体必须至少具有两个标记基因.另外,pBR322质粒载体还具较高的拷贝数,而且经过氯霉素扩增之后,每个细胞中可积累1000~3000个拷贝,这就为重组体DNA的制备提供了极大的方便.