PCR技术扩增目的基因中的引物有什么作用?是不是能控制复制次数?
问题描述:
PCR技术扩增目的基因中的引物有什么作用?
是不是能控制复制次数?
答
引物可以做为DNA复制开始时DNA聚合酶的结合位点,在细胞外的条件下,只有通过引物,DNA才可以开始进行复制。引物是已知序列的DNA小片段。
答
1.与DNA复制中的作用类似,但是在细胞内有其他的酶进行这项工作。在PCR技术中,只加入了四种底物和Taq酶,模板。DNA聚合酶只能在有3‘端时才能复制下去。
2.决定扩增片段。扩增目的基因,就要根据目的基因两侧序列设计引物,这样只有目的基因扩增了,得到大量目的基因。这是PCR技术的一项重要应用。
答
引物的功能是作为核苷酸聚合的起始点,引导DNA的合成.
能设定循环次数,及控制复制次数.PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度.一般的循环次数选在30~40次之间,循环次数越多,非特异性产物的量亦随之增多.
答
没有引物,DNA复制的起点就不确定了,用于DNA复制的DNA单链是很长的,不光是目的基因(和其他你所需要的),而在基因工程中我们需要的DNA片段比较起来是很短的,也就是说只要一对引物(这个寡聚核苷酸片段)之间所夹的这一部分的DNA片段,为了准确地合成这段所需基因,我们需要一对引物的参与。