用定磷法测定核酸含量时结果总是大于100%,问题可能出现在哪里?数据应该是没有问题
问题描述:
用定磷法测定核酸含量时结果总是大于100%,问题可能出现在哪里?
数据应该是没有问题
答
调整pH值的时候出现终点附近的跃迁是正常现象如果不能返滴的话,调节的时候把pH值控制在5.5~8.5左右都是可以接受的,特别是你用那么大浓度的碱液
答
还好我这个做核酸做了8年的人看到了,不止核酸中含磷,核苷酸和核苷也含磷,尤其是核苷难溶于水,PH中性也会析出,最容易导致影响测定;另外不同的CAUG比例也会导致测定结果有偏差
一般用定磷法和紫外法相结合,还要结合你的产品,就是这样,得出的数据只是相对值,只能反映你每一批和每一批的差异,不能反映你和别的公司产品的差异