DNA紫外吸收的原理是什么?DNA在变性时吸光值升高.那么DNA紫外吸收的原理是什么呢?什么是吸光值?为什么DNA在变性时吸光值会增加呢?

问题描述:

DNA紫外吸收的原理是什么?
DNA在变性时吸光值升高.那么DNA紫外吸收的原理是什么呢?什么是吸光值?为什么DNA在变性时吸光值会增加呢?

纯化柱是表面偶联有二乙胺乙醇(DEAE)的亲水性树脂.DNA纯化原理为DNA磷酸基带负电荷, DEAE带正电荷, DNA可以在0.1~1.4 mol.L-1的相当大的盐浓度范围内仍与DEAE 结合, 当低盐QBT溶液平衡纯化柱后, 即可加样, 用中等盐浓度的QC洗去RNA和其他杂质, 最后用高盐浓度的QF将DNA洗脱下来。
由于传统的离子交换范围仅在0.4 mol.L-1以内, 使杂质和DNA 洗脱范围十分接近, 难于达到满意的纯化效果. 但该柱一经使用, 6h后纯化效力即开始下降。估计可能得原因有二, 一是树脂表面亲水性强, 极易吸附蛋白, 糖类, RNA等水容物, 从而使原装柱经几次循环后吸附过多杂质, 影响了DEAE吸附DNA的能力, 同时杂质阻塞树脂间隙, 使液体流过柱子的速度明显变慢, 二是DEAE与树脂的偶联并不十分稳定, 在一经使用后的液体环境中,容易逐步解离.

所谓的吸光值就是DNA分子遮挡住的紫外线通路。。。
变形DNA变成了两条双链,,所以能更多的挡住紫外线通过。。
希望你听明白了。。
再补充一下吧。。任何不透光的东西都能挡住光的通路,就叫吸光值。。

所谓的吸光值就是DNA分子遮挡住的紫外线通路.变形DNA变成了两条双链,所以能更多的挡住紫外线通过.因为DNA含嘌呤碱跟嘧啶碱,所以能进行紫外吸收.吸光值在260NM处.变性时,变性 DNA 的双链解开 ,DNA的碱基处于暴露状态,...

因为DNA含嘌呤碱跟嘧啶碱,所以能进行紫外吸收。
吸光值在260NM处。
变性时,变性 DNA 的双链解开 , DNA的碱基处于暴露状态,碱基中电子的相互作用更有利于紫外吸收 , 所以吸光值增加,称为增色效应。