请教一些关于DAPI染色的问题,急我最近开始做水体细菌计数,采用的是DAPI染色.经过染色后在荧光显微镜下观察,到底是该显绿色还是蓝色啊?第一次我做的发绿色荧光,第二次换了个显微镜看到的又是蓝色荧光,谁知道是怎么回事啊?还有DAPI染色中避光的操作到底要多严格才不至于影响结果?如果DAPI和吖啶橙双重染色,理论上应该是什么结果呢?

问题描述:

请教一些关于DAPI染色的问题,急
我最近开始做水体细菌计数,采用的是DAPI染色.经过染色后在荧光显微镜下观察,到底是该显绿色还是蓝色啊?第一次我做的发绿色荧光,第二次换了个显微镜看到的又是蓝色荧光,谁知道是怎么回事啊?还有DAPI染色中避光的操作到底要多严格才不至于影响结果?如果DAPI和吖啶橙双重染色,理论上应该是什么结果呢?

DAPI肯定是蓝色
DAPI相对很容易染上色,避光处理时加样等操作短时见光没有关系的,但是不操作的时候需要暗盒或锡纸包裹.